要解决ASP.Net网络应用程序无法读取文件夹中的文件的问题，可以采取以下解决方法：

1. 确保应用程序具有足够的权限来访问文件夹中的文件。可以通过以下步骤来实现：

string folderPath = @"C:\YourFolderPath";
DirectoryInfo folderInfo = new DirectoryInfo(folderPath);

// 授予应用程序访问权限
DirectorySecurity folderSecurity = folderInfo.GetAccessControl();
folderSecurity.AddAccessRule(new FileSystemAccessRule("IIS AppPool\\YourAppPoolName", FileSystemRights.Read, InheritanceFlags.ContainerInherit | InheritanceFlags.ObjectInherit, PropagationFlags.None, AccessControlType.Allow));
folderInfo.SetAccessControl(folderSecurity);

上述代码中的YourFolderPath应替换为文件夹的实际路径，YourAppPoolName应替换为应用程序池的名称。

2. 确保文件夹和文件的路径是正确的。可以使用Server.MapPath方法将相对路径转换为绝对路径，如下所示：

string filePath = Server.MapPath("~/YourFolder/YourFile.txt");

上述代码中的YourFolder和YourFile.txt应替换为文件夹和文件的实际名称。

3. 确保文件夹和文件存在。可以使用Directory.Exists和File.Exists方法来检查文件夹和文件是否存在，如下所示：

string folderPath = @"C:\YourFolderPath";
string filePath = Path.Combine(folderPath, "YourFile.txt");

if (Directory.Exists(folderPath) && File.Exists(filePath))
{
    // 执行读取文件的操作
}
else
{
    // 文件夹或文件不存在，进行相应的错误处理
}

上述代码中的YourFolderPath和YourFile.txt应替换为文件夹和文件的实际名称。

通过以上方法，您应该能够解决ASP.Net网络应用程序无法读取文件夹中的文件的问题。