要解决在AWS EC2上的虚拟主机子域名无法工作的问题，您可以按照以下步骤进行操作：

1. 检查您的虚拟主机配置文件 确保您的虚拟主机配置文件（通常是/etc/httpd/conf/httpd.conf或/etc/apache2/sites-available/your_domain.conf）中包含正确的子域名配置。确保配置中的ServerName和ServerAlias指令包含您的子域名。例如：

   ServerName your_domain.com
   ServerAlias subdomain.your_domain.com
   

2. 修改您的操作系统的 hosts 文件 编辑您的操作系统的 hosts 文件，将子域名和服务器的IP地址关联起来。您可以在/etc/hosts（对于Linux / macOS）或C:\Windows\System32\drivers\etc\hosts（对于Windows）中找到此文件。例如，添加以下行：

   127.0.0.1 subdomain.your_domain.com
   

3. 检查您的域名解析设置 确保您的域名解析设置指向了正确的服务器IP地址。登录到您的域名注册商的控制面板，并确保您的子域名指向了正确的AWS EC2实例的公共IP地址。

4. 检查AWS EC2安全组设置 确保您的AWS EC2实例的安全组设置允许HTTP或HTTPS流量通过。您可以在AWS管理控制台中的EC2实例的安全组设置中进行配置。

5. 检查AWS EC2实例防火墙设置 确保您的AWS EC2实例的防火墙设置允许HTTP或HTTPS流量通过。您可以使用AWS EC2实例的操作系统的防火墙工具（如iptables）进行配置。

6. 重启Apache服务器 在您进行以上更改后，重启Apache服务器以使更改生效。您可以使用以下命令来重启Apache服务器：

   对于Ubuntu / Debian系统：

   sudo service apache2 restart
   

   对于CentOS / RHEL系统：

   sudo service httpd restart
   

7. 清除DNS缓存 在您进行以上更改后，您可能需要清除本地计算机或网络上的DNS缓存。您可以使用以下命令来清除DNS缓存：

   对于Linux系统：

   sudo /etc/init.d/dns-clean restart
   

   对于Windows系统，打开命令提示符窗口并运行以下命令：

   ipconfig /flushdns
   

完成以上步骤后，您的AWS EC2上的虚拟主机子域名应该可以正常工作了。如果问题仍然存在，请检查您的应用程序代码和日志以查找任何其他潜在的问题。